生防菌Y26的鉴定、发酵优化及其杀线虫活性测定

doi:10.16409/j.cnki.2095-039x.2024.02.005

中国生物防治学报 ›› 2024, Vol. 40 ›› Issue (2): 424-434.DOI: 10.16409/j.cnki.2095-039x.2024.02.005

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生防菌Y26的鉴定、发酵优化及其杀线虫活性测定

梅凤珍¹, 周明超¹, 杨丹¹, 李香风⁵, 孔令安³, 刘建斌⁴, 史凤玉^1,2

1. 河北科技师范学院农学与生物科技学院, 昌黎 066004;
2. 河北科技师范学院河北省作物逆境生物学重点实验室, 昌黎 066004;
3. 中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京 100193;
4. 北京市农林科学院植物营养与资源环境研究所, 北京 100097;
5. 河北省邯郸市园林局, 邯郸 056000

收稿日期:2023-09-01 发布日期:2024-04-28
通讯作者: 史凤玉,副教授,E-mail:shify2021@163.com。
作者简介:梅凤珍,女,硕士研究生,E-mail:386631317@qq.com。
基金资助:
河北省重点研发计划项目（ 21326502D）；植物病虫害生物学国家重点实验室开放基金（ SKL0F202115）

Identification,Fermentation Optimization and Determination of Nematicidal Activity of Biocontrol Bacterium Y26

MEI Fengzhen¹, ZHOU Mingchao¹, YANG Dan¹, LI Xiangfeng⁵, KONG Lingan³, LIU Jianbin⁴, SHI Fengyu^1,2

1. College of Agronomy and Biotechnology, Hebei Normal University of Science and Technology, Changli 066004, China;
2. Key Laboratory of crop stress biology, Hebei Normal University of Science and technology, Changli 066004, China;
3. State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests/Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China;
4. Institute of Plant Nutrition, Resources and Environment, Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Beijing 100097, China;
5. Handan Garden Bureau of Hebei Province, Handan 056000, China

Received:2023-09-01 Published:2024-04-28

摘要/Abstract

摘要： 为防治黄瓜根结线虫病，本实验室前期从黄瓜根际土壤分离出的一株细菌Y26，测定其发酵液对根结线虫的生物活性，经发酵液处理后的根结线虫校正死亡率为95.12%，卵孵化的相对抑制率为83.51%，故菌株Y26可作为根结线虫生防菌资源；通过形态学观察及分子生物学方法鉴定菌株Y26为短小芽胞杆菌Bacillus pumilus；通过Plackett-Burma法和响应面分析试验得到菌株Y26发酵优化的条件是：玉米粉2.14%，豆饼粉3%，K₂HPO₄ 0.57%，MgSO₄·7H₂O 0.21%，种龄12 h，pH为7.2，接种量2%，培养温度28℃，装瓶量为50 mL/250 mL，发酵优化后，菌液中芽胞浓度提高25.69%，10%发酵液对根结线虫的校正死亡率从优化前的78.03%提高到93.32%。研究结果表明，经发酵优化后的Y26菌液杀线虫活性显著提高，可作为杀线生物菌剂开发应用。

关键词: 根结线虫, 短小芽胞杆菌, 鉴定, 发酵条件优化

Abstract: To control the root-knot nematode disease in cucumber,a bacterial strain Y26 was isolated from cucumber rhizosphere soil in the laboratory.Bio-activity of fermentation broth against root-knot nematodes was determined.The corrected mortality rate of the second-stage juveniles treated with fermentation broth for 24 hours was 95.12%,and the relative inhibition rate of eggs hatching reached 83.51% after 48 hours of fermentation broth treatment,so strain Y26 can be used as a bacterial control resource for root-knot nematodes disease.Strain Y26 was identified as Bacillus pumilus by morphological observation and molecular identification.The optimized conditions for fermentation of strain Y26 by Plackett-Burma design and response surface analysis were corn flour 2.14%,bean cake flour 3%,K₂HPO₄ 0.57%,MgSO₄·7H₂O 0.21%,cultural time 12 hours,pH 7.2,inoculation amount 2%,cultural temperature 28℃,and the media amount was 50 mL/250 mL.After fermentation optimization,the spore concentration was increased by 25.69%,the corrected mortality rate of 10% fermentation broth increased from 78.03% to 93.32% before optimization.The results showed that the activity of optimized Y26 fermentation broth root-knot nematodes was significantly increased and could be developed and applicated as a biological nematicide.

Key words: root-knot nematode, Bacillus pumilus, identification, optimization of fermentation conditions

中图分类号:

S476

梅凤珍, 周明超, 杨丹, 李香风, 孔令安, 刘建斌, 史凤玉. 生防菌Y26的鉴定、发酵优化及其杀线虫活性测定[J]. 中国生物防治学报, 2024, 40(2): 424-434.

MEI Fengzhen, ZHOU Mingchao, YANG Dan, LI Xiangfeng, KONG Lingan, LIU Jianbin, SHI Fengyu. Identification,Fermentation Optimization and Determination of Nematicidal Activity of Biocontrol Bacterium Y26[J]. Chinese Journal of Biological Control, 2024, 40(2): 424-434.

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生防菌Y26的鉴定、发酵优化及其杀线虫活性测定

Identification,Fermentation Optimization and Determination of Nematicidal Activity of Biocontrol Bacterium Y26

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