枯草芽胞杆菌YN145分离鉴定及抑菌活性

doi:10.16409/j.cnki.2095-039x.2017.03.018

中国生物防治学报 ›› 2017, Vol. 33 ›› Issue (2/3): 421-426.DOI: 10.16409/j.cnki.2095-039x.2017.03.018

枯草芽胞杆菌YN145分离鉴定及抑菌活性

邹秋霞^1,2,3, 任佐华^1,2, 高诗涵¹, 周瑚^1,2,3, 赵建辉^1,2,3, 刘二明^1,2,3

1. 湖南农业大学植物保护学院, 长沙 410128;
2. 植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室, 长沙 410128;
3. 南方粮油作物协同创新中心, 长沙 410128

收稿日期:2016-10-18 出版日期:2017-06-08 发布日期:2017-04-08
通讯作者: 刘二明,教授,E-mail:ermingLiu@163.com
作者简介:邹秋霞,硕士研究生,E-mail:1609033805@qq.com
基金资助:
公益性行业（农业）科研专项（201203014）；湖南省“十二五”重点学科（0904）；国家重点研发计划（2016YFD0300700）

Isolation and Identification of Bacillus subtilis YN145 against Magnaporthe oryzae and Its Antimicrobial Activities

ZOU Qiuxia^1,2,3, REN Zuohua^1,2, GAO Shihan¹, ZHOU Hu^1,2,3, ZHAO Jianhui^1,2,3, LIU Erming^1,2,3

1. College of Plant Protection, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China;
2. Hunan Provincial Key Laboratory for Biology and Control of Plant Diseases and Insect Pests, Changsha 410128, China;
3. Southern Regional Collaborative Innovation Center for Grain and Oil Crops in China, Changsha 410128, China

Received:2016-10-18 Online:2017-06-08 Published:2017-04-08

摘要/Abstract

摘要： 为挖掘用于稻瘟病防治的微生物资源，从感病水稻品种湘早籼24号的健康植株茎叶中用稀释分离法获得527个菌株。采用平板对峙法筛选出对稻瘟病菌具有拮抗作用的菌株60个，其中菌株YN145对稻瘟病菌菌丝生长抑制率达84.31%。经形态学和生理生化鉴定及16S rDNA序列分析，将菌株YN145鉴定为枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis。生物活性测定表明，该菌株继代培养25代后，对稻瘟病菌菌丝抑菌效果仍在80%以上。菌株YN145发酵离心上清液经40、60、80、100和120 ℃处理30 min后，对稻瘟病菌的抑制率分别为91.50%、92.35%、91.78%、90.93%和86.97%；同样发酵上清滤液分别在pH 3、5、7、9和11处理30 min后，对稻瘟病菌的抑制率分别为91.50%、92.92%、92.92%、92.35%和92.63%。表明抗菌物质能耐高温、耐酸碱，菌株YN145作为稻瘟病生防制剂研发具有一定的价值。

关键词: 稻瘟病菌, 枯草芽胞杆菌, 抑菌活性

Abstract: In order to explore the microbial resources for controlling rice blast, caused by Magnaporthe oryzae, 527 strains were isolated from healthy rice plants of the susceptible cultivar Xiangzaoxian 24 by the method of plate dilution. 60 strains with antagonistic activity against the blast fungus were obtained. The strain YN145 showed the strongest inhibition activity on mycelium growth with the rate of 84.31%. Based on the morphological analysis, physiological and biochemical characteristics, and 16S rDNA phylogeny, the strain YN145 was identified as Bacillus subtilis. Biological activity test showed that YN145 still had the inhibition rate of more than 80% on mycelium growth after 25 generations of subcultures. Fermentation supernatant of the strain could inhibit the mycelium growth by the rate of 91.50%, 92.35%, 91.78%, 90.93% and 86.97%, respectively, after treated at 40, 60, 80, 100 and 120 ℃ for 30 min. Meanwhile, the fermentation filtrate could inhibit the mycelium growth by the rate of 91.50%, 92.92%, 92.92%, 92.35% and 92.63%, respectively, after treated by pH 3, 5, 7, 9 or 11 for 30 min. The results suggested that antifungal substance of YN145 may be resistant to high temperatures and anti-acid and alkali. Thus, the strain YN145 is worthy for further research and development as rice blast bio-control agents.

Key words: Magnaporthe oryzae, Bacillus subtilis, antimicrobial activities

中图分类号:

S476

邹秋霞, 任佐华, 高诗涵, 周瑚, 赵建辉, 刘二明. 枯草芽胞杆菌YN145分离鉴定及抑菌活性[J]. 中国生物防治学报, 2017, 33(2/3): 421-426.

ZOU Qiuxia, REN Zuohua, GAO Shihan, ZHOU Hu, ZHAO Jianhui, LIU Erming. Isolation and Identification of Bacillus subtilis YN145 against Magnaporthe oryzae and Its Antimicrobial Activities[J]. journal1, 2017, 33(2/3): 421-426.

参考文献

[1] Zhang Q F. Strategies for developing green super rice[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2007, 104(42): 16402-16409.
[2] 张传清, 周明国, 朱国念, 等. 稻瘟病化学防治药剂的历史沿革与研究现状[J]. 农药学学报, 2009, 11(1): 72-80.
[3] Yu Q, Liu Z, Lin D, et al. Characterization and evaluation of Staphylococcus sp. strain LZ16 for the biological control of rice blast caused by Magnaporthe oryzae[J]. Biological Control, 2013, 65(3): 338-347.
[4] 温小红, 谢明杰, 姜健, 等. 水稻稻瘟病防治方法研究进展[J]. 中国农学通报, 2013, 29(3): 190-195.
[5] Etesami H, Alikhani H A. Evaluation of Gram-positive rhizosphere and endophytic bacteria for biological control of fungal rice (Oryzia sativa L.) pathogens[J]. European Journal of Plant Pathology, 2016, 147(1): 7-14.
[6] 刘彩云, 许瑞瑞, 季洪亮, 等. 一株生防内生真菌的分离筛选、鉴定及抑菌特性[J]. 植物保护学报, 2015, 42(5): 806-812.
[7] 韩长志. 植物病害生防菌的研究现状及发展趋势[J]. 中国森林病虫, 2015(1): 33-37.
[8] 李双东. 防治稻瘟病芽胞杆菌的筛选及生防机制研究[D]. 北京: 中国农业大学, 2015.
[9] 穆常青, 刘雪, 陆庆光, 等. 枯草芽胞杆菌B-332菌株对稻瘟病的防治效果及定殖作用[J]. 植物保护学报, 2007, 34(2): 123-128.
[10] 李瑞芳, 赵玉峰, 魏建, 等. 具有稻痘病菌措抗活性的枯草芽胞杆菌的分离与鉴定[J]. 河南农业科学, 2010, 39(3): 63-66.
[11] Ali H, Nadarajah K. Evaluating the efficacy of Trichoderma spp. and Bacillus substilis as biocontrol agents against Magnaporthe grisea in rice[J]. Australian Journal of Crop Science, 2014, 8(9): 1324-1335.
[12] 陈志谊. 芽胞杆菌类生物杀菌剂的研发与应用[J]. 中国生物防治学报, 2015, 31(5): 723-732.
[13] 管玲莉, 任佐华, 李俊俊, 等. 一株拮抗稻瘟病细菌的筛选与鉴定[J]. 生物学技术通报, 2016, 32(6): 168-173.
[14] 陈捷. 现代植物病理学研究方法[M]. 北京: 中国农业出版社, 2007, 11.
[15] 方中达. 植病研究方法[M]. 北京: 中国农业出版社, 2007, 46-47.
[16] 东秀珠, 蔡妙英. 常见细菌系统鉴定手册[M]. 北京: 科学出版社, 2001, 9-42.
[17] Holt J G, Krieg N R. Bergey's manual of systematic bacteriology (9th ed)[M]. Baltimore: Williams and Wilkins Co., 1994, 353-376.
[18] 周鑫钰, 朱宏建, 周倩, 等. 1株烟草青枯病拮抗内生细菌的分离及鉴定[J]. 湖南农业大学学报, 2011, 37(6): 637-640, 664.
[19] 宋雯雯, 覃强, 田甜, 等. 稻瘟病菌拮抗微生物的筛选[J]. 农业科学研究, 2009, 30(2): 15-17.
[20] 王玉霞, 李晶, 曹旭, 等. 内生细菌 B10 对稻瘟病菌抑制作用的初步研究[J]. 生物技术, 2012, 22(1): 85-87.
[21] 孙广字, 宗兆峰, 王建明, 等. 植物病理学实验技术[M]. 北京: 中国农业出版社, 2002, 142-143.
[22] 陈刘军, 俞仪阳, 王超, 等. 蜡质芽胞杆菌AR156防治水稻纹枯病机理初探[J]. 中国生物防治学报, 2014, 30(1): 107-112.
[23] Zhang C, Zhang X, Shen S. Proteome analysis for antifungal effects of Bacillus subtilis KB-1122 on Magnaporthe grisea P131[J]. World Journal of Microbiology and Biotechnology, 2014, 30(6): 1763-1774.
[24] Sha Y, Wang Q, Yan L. Suppression of Magnaporthe oryzae and interaction between Bacillus subtilis and rice plants in the control of rice blast[J]. Springer Plus, 2016, 5(1): 1238.
[25] 中国农药信息网. http://www.chinapesticide.gov.cn/ [DB]. 2016, 9.
[26] 闫玉芳, 董代文. 枯草芽胞杆菌在稻瘟病控害中的应用[J]. 植物医生, 2015, 28(2): 4-6.
[27] 黄曦, 许兰兰, 黄荣韶, 等. 枯草芽胞杆菌在抑制植物病原菌中的研究进展[J]. 生物技术通报, 2010(1): 24-29.
[28] 贾书娟, 曾大兴, 吴小丽, 等. 枯草芽胞杆菌 C-D6抗菌蛋白对稻瘟病菌的抑制作用[J]. 中国生物防治学报, 2011, 27(3): 362-367.
[29] 邓建良, 刘红彦, 王鹏涛, 等. 生防芽胞杆菌脂肽抗生素研究进展[J]. 植物保护, 2010, 36(3): 20-25.
[30] 金鑫. 稻瘟病生防菌Af1、Af4的初步研究[D]. 武汉: 华中农业大学, 2010.

枯草芽胞杆菌YN145分离鉴定及抑菌活性

Isolation and Identification of Bacillus subtilis YN145 against Magnaporthe oryzae and Its Antimicrobial Activities

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价

联系我们

[1]	朱峰, 王继春, 田成丽, 祁山颜, 王东元, 任金平, 王义山. 枯草芽胞杆菌GB519抗菌蛋白的理化性质及生防效果[J]. 中国生物防治学报, 2020, 36(5): 778-785.
[2]	郭洁心, 张育铭, 朱洪磊, 任璐, 张宝俊. 解淀粉芽胞杆菌XJ5挥发性物质抑菌活性及对苹果褐腐病防效测定[J]. 中国生物防治学报, 2020, 36(4): 575-580.
[3]	谭峥, 王雨, 杨欢, 刘文波, 缪卫国, 靳鹏飞. 贝莱斯芽胞杆菌HN-2发酵上清液抑制三种黄单胞菌的生物活性研究[J]. 中国生物防治学报, 2020, 36(3): 414-420.
[4]	周瑚, 胡玲, 余曦玥, 朱华珺, 任佐华, 刘二明. 特基拉芽胞杆菌JN-369抗菌粗蛋白的理化性质和抑菌效果[J]. 中国生物防治学报, 2020, 36(2): 211-219.
[5]	王雨, 谭峥, 韦丹丹, 缪卫国, 刘文波, 靳鹏飞. 贝莱斯芽胞杆菌HN-2的鉴定及对杧果炭疽菌的抑菌活性研究[J]. 中国生物防治学报, 2020, 36(2): 220-230.
[6]	鹿秀云, 赵卫松, 白颖, 马丽, 张丽红, 商俊燕, 苏振贺, 郭庆港, 张晓云, 王培培, 闫磊, 马平, 李社增. 利用微生物杀菌剂防治马铃薯黄萎病[J]. 中国生物防治学报, 2020, 36(2): 280-287.
[7]	千慧敏, 赵辉, 刘新涛, 倪云霞, 邱睿, 李小杰, 赵新贝, 李淑君, 刘红彦, 文艺. 生防细菌PA2101和PG3402抑菌和促生特性的研究[J]. 中国生物防治学报, 2020, 36(1): 135-144.
[8]	季冠宁, 汪志鹏, 焦加国, 胡锋, 李辉信. 枯草芽胞杆菌M29产抑菌物质培养条件的优化及抑菌物质组成初探[J]. 中国生物防治学报, 2019, 35(6): 930-939.
[9]	刘治会, 杨成德, 金梦军, 李统华, 陈星伊, 魏立娟, 崔凌霄, 杨丽萍. 枯草芽胞杆菌262XY2x固体发酵条件优化及对马铃薯炭疽病的防治效果[J]. 中国生物防治学报, 2019, 35(4): 586-596.
[10]	冯福山, 刘君昂, 胡廉成, 文瑞芝, 周国英. 枯草芽胞杆菌Y13挥发性物质的分析及抑菌活性[J]. 中国生物防治学报, 2019, 35(4): 597-604.
[11]	周海琪, 程萍, 宫庆友, 喻国辉, 温书恒. 锰消除镰刀菌酸对枯草芽胞杆菌R31生物被膜形成的抑制[J]. 中国生物防治学报, 2019, 35(4): 613-621.
[12]	张洁, 汤蒙蒙, 夏明聪, 林琪童, 孙润红, 杨艳艳, 杨丽荣, 李洪连. 枯草芽胞杆菌YB-05与申嗪霉素复配防治小麦茎基腐病[J]. 中国生物防治学报, 2018, 34(6): 866-872.
[13]	王玉双, 肖蓉, 郭照辉, 曾奥, 付祖姣, 杨华, 罗容珺, 胡展, 单世平, 雷平. 来源于中药的稻瘟病菌拮抗解淀粉芽胞杆菌鉴定及其活性成分特性[J]. 中国生物防治学报, 2018, 34(5): 746-752.
[14]	甘玉姿, 肖贵, 邓启云, 吴俊, 柏斌, 卢向阳, 周波. 菲律宾稻瘟病菌生理小种中AVR-Pita及其同源基因的序列与功能分析[J]. 中国生物防治学报, 2018, 34(3): 488-498.
[15]	乔俊卿, 罗德旭, 彭彪, 孙玉东, 刘永锋, 刘邮洲. 枯草芽胞杆菌PTS-394可湿性粉剂对辣椒根系及根际微生态影响[J]. 中国生物防治学报, 2018, 34(2): 287-293.