关防风立枯病病原菌根际拮抗细菌筛选与鉴定

doi:10.16409/j.cnki.2095-039x.2022.02.021

摘要/Abstract

摘要： 为筛选出对立枯丝核菌Rhizoctonia solani Kühn具有优良防效的拮抗菌株。本研究从关防风根际土壤中分离纯化出156株细菌，采用平板对峙法测定菌株SC-32和SC-127对立枯丝核菌均有良好拮抗效果，且兼具广谱抑菌能力；抗生素标记法测定菌株SC-32和SC-127接种35 d后在土壤中含菌量仍能保持2.93×10⁷和7.83×10⁶CFU/g；通过盆栽试验研究结果表明，菌株SC-32和SC-127对关防风立枯病的防治效果为60.53%和65.89%，高于菌剂和农药处理。通过形态学、生理生化特征、16S rDNA基因序列进行分类学鉴定确定菌株SC-32和SC-127均为贝莱斯芽胞杆菌Bacillus velezensis。

关键词: 关防风立枯病, 拮抗细菌, 筛选, 定殖, 防病

Abstract: This study aims to discover antagonistic strains with good control effect against Rhizoctonia solani. 156 bacterial strains were identified and purified from Saposhnikovia divaricata rhizosphere soil, and both strains SC-32 and SC-127 exhibited good antagonistic effects against R. solani by plate antagonism technique, as well as broad-spectrum antibacterial capacity. 35 days post antibiotic labeling inoculation, the quantities of SC-32 and SC-127 remained 2.93×10⁷ and 7.83×10⁶CFU/g in soil, respectively. Pot experiment revealed that SC-32 and SC-127 had 60.53% and 65.89% control efficacies on S. divaricata seedling damping-off, respectively, which were greater than thiophanate-methyl, Trichoderma harzianum, and Bacillus subtilis. Based on analyses of morphological, physiological, and biochemical properties, as well as the 16S rDNA gene sequence, the strains SC-32 and SC-127 were identified as Bacillus velezensis.

Key words: Saposhnikovia divaricata seedling damping-off, antagonistic bacterium, screening, colonization, control effect

中图分类号:

S432.4

陈逢玲, 于航, 常丽娜, 孙卓, 林红梅, 杨利民. 关防风立枯病病原菌根际拮抗细菌筛选与鉴定[J]. 中国生物防治学报, 2022, 38(3): 681-688.

CHEN Fengling, YU Hang, CHANG Lina, SUN Zhuo, LIN Hongmei, YANG Limin. Screening and Identification of the Antagonistic Bacteria against Saposhnikovia divaricata Seedling Damping-off[J]. Chinese Journal of Biological Control, 2022, 38(3): 681-688.

参考文献

[1] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典[S]. 一部.北京:中国医药科技出版社, 2020, 158.
[2] 王艺涵, 赵佳琛, 翁倩倩, 等. 经典名方中防风的本草考证[J]. 中国现代中药, 2020, 22(8):1331-1339.
[3] 胥苗苗. 水分胁迫对防风质量、生理生态特性及关键酶活性影响[D]. 长春:吉林农业大学, 2016.
[4] 姚国君, 束月征, 陈申宽. 防风立枯病和枯萎病的诊断[J]. 内蒙古草业, 2000, 93(2):8-9.
[5] 于水清, 杨毅清, 张岱, 等. 马铃薯早疫病拮抗细菌的筛选、鉴定及抑菌物质研究[J]. 西南农业学报, 2021, 34(6):1234-1241.
[6] 尚笑男, 刘君昂, 冯福山, 等. 油茶内生拮抗细菌的筛选、鉴定及防效[J]. 中国生物防治学报, 2021, 37(3):575-583.
[7] 陈志垚, 王鹏, 王微, 等. 马铃薯疮痂病菌Streptomyces scabies拮抗细菌的筛选及BKS104鉴定[J]. 微生物学通报, 2021, 48(11):4145-4155.
[8] 许乐, 王子强, 张爽, 等. 丹参根腐病拮抗细菌筛选、鉴定及生防机理研究[J]. 中国生物防治学报, 2021, 37(4):846-854.
[9] 张慧, 杨兴明, 冉炜, 等. 土传棉花黄萎病拮抗菌的筛选及其生物效应[J]. 土壤学报, 2008, 45(6):1095-1101.
[10] 高菲, 卜春亚, 靳永胜, 等. 草莓根腐病拮抗细菌的分离筛选与鉴定[J]. 广东农业科学, 2012, 39(3):4-8.
[11] 孙卓. 人参病害生防细菌的筛选及其防病作用研究[D]. 长春:吉林农业大学, 2014.
[12] 游成真, 李平兰, 张志刚, 等. 黄瓜立枯病高效拮抗菌的筛选与鉴定[J]. 中国农业大学学报, 2015, 20(1):90-95.
[13] Yun C, Wang J D, Wu H S, et al. Soil chemical and microbial responses to biogas slurry amendment and its effect on Fusarium wilt suppression[J]. Applied Soil Ecology, 2016, 107(1):116-123.
[14] 张影珍, 马养民, 王鹏飞, 等. 秦岭药用植物防风内生真菌的分离鉴定及抑菌活性研究[J]. 青岛科技大学学报(自然科学版), 2015, 36(2):155-159.
[15] 马静, 田义新, 王志清, 等. 防风内生拮抗细菌的分离与鉴定[J]. 吉林农业大学学报, 2021, 43(4):1-6.
[16] 冯印印, 李斌, 杨洋, 等. 烟草青枯病菌拮抗细菌的筛选、鉴定和抑菌机制研究[J]. 中国生物防治学报, 2021, 37(2):331-339.
[17] 孙卓, 杨利民. 人参灰霉病拮抗细菌的筛选及鉴定[J]. 植物保护学报, 2016, 43(6):935-942.
[18] 陆志翔. 香蕉枯萎病菌的鉴定及其拮抗细菌的筛选[D]. 南宁:广西大学, 2015.
[19] 杨德政, 孙光军, 桑维钧. 一株烟草赤星病拮抗细菌Y6的筛选·鉴定及生长条件优化[J]. 安徽农业科学, 2021, 49(8):130-133+137.
[20] 高芬, 赵晓霞, 闫欢, 等. 黄芪根腐病拮抗芽胞杆菌的筛选鉴定及其对根围细菌群落的影响[J]. 中国中药杂志, 2019, 44(18):3942-3947.
[21] 王磊, 王兴兰, 郭瑞, 等. 1株抗烟草青枯病菌拮抗菌的筛选及鉴定[J]. 安徽农学通报, 2020, 26(23):89-90.
[22] 杨洪凤, 薛雅蓉, 余向阳, 等. 内生解淀粉芽胞杆菌CC09菌株在小麦叶部的定殖能力及其防治白粉病效果研究[J]. 中国生物防治学报, 2014, 30(4):481-488.
[23] 肖春萍. 人参根际土壤微生物多样性及其生防真菌资源开发研究[D]. 长春:吉林农业大学, 2015.
[24] 张华梦, 郑礼煜, 王继春, 等. 水稻纹枯病生防细菌筛选及其与病原菌侵染垫形成的关系[J]. 植物保护学报, 2021, 48(2):289-297.
[25] 刘佳, 张匀华, 孟庆林, 等. 向日葵菌核病接种方法及品种抗病性鉴定[J]. 植物保护, 2016, 42(2):136-141.
[26] 齐俊生, 李怀方. 一种检测棉花黄萎菌毒素致萎性的新方法-叶片针刺涂抹法[J]. 棉花学报, 2006, 20(2):210-217.
[27] 张华梦, 郑礼煜, 王继春, 等. 水稻纹枯病生防细菌筛选及其与病原菌侵染垫形成的关系[J]. 植物保护学报, 2021, 48(2):289-297.
[28] 东秀珠, 蔡妙英. 常见细菌系统鉴定手册[M]. 北京:科学出版社, 2001.
[29] Buchanan R E, Gibbons N E. Bergeys manual of systematic bacteriology (9th Ed)[S]. Baltimore:Williams and Wilkins Company, 1994.
[30] 孙卓, 杨利民. 人参锈腐病生防细菌的筛选及鉴定[J]. 中国生物防治学报, 2015, 31(4):536-542.
[31] 杨利民. 中药材生态种植理论与技术前沿[J]. 吉林农业大学学报, 2020, 42(4):355-363.
[32] 王超, 郭坚华, 席运官, 等. 拮抗细菌在植物病害生物防治中应用的研究进展[J]. 江苏农业科学, 2017, 45(18):1-6.
[33] 孙卓, 杨利民. 人参锈腐病生防细菌的筛选及鉴定[J]. 中国生物防治学报, 2015, 31(4):536-542.
[34] 陈志垚, 王鹏, 王微, 等. 马铃薯疮痂病菌Streptomyces scabies拮抗细菌的筛选及BKS104鉴定[J]. 微生物学通报, 2021, 48(11):4145-4155.
[35] 申永瑞, 向君亮, 王佳琦, 等. 疮痂链霉菌拮抗菌株BU396的分离鉴定与抗菌性质分析[J]. 微生物学通报, 2019, 46(10):2601-2611.
[36] 孙平平, 崔建潮, 贾晓辉, 等. 贝莱斯芽胞杆菌L-1对梨灰霉和青霉病菌的抑制作用评价及全基因组分析[J].微生物学报, 2018, 58(9):1637-1646.
[37] 张德锋, 高艳侠, 王亚军, 等. 贝莱斯芽胞杆菌的分类、拮抗功能及其应用研究进展[J]. 微生物学通报, 2020, 47(11):3634-3649.
[38] 张德珍, 迟文娟, 李婷婷, 等. 辣椒疫病生防菌的防病促生作用及其鉴定[J]. 山东农业科学, 2021, 53(10):91-96.