贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis YB15 β-葡聚糖酶的抑菌作用与基因克隆

贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis YB15 β-葡聚糖酶的抑菌作用与基因克隆

徐婷¹, 朱天辉¹, 李姝江², 谯天敏³

1. 四川农业大学林学院, 雅安 625014;2. 四川农业大学森林保护省级重点实验室, 雅安 625014;3. 长江上游林业生态工程省级重点实验室, 雅安 625014

收稿日期:2013-01-29 修回日期:1900-01-01 出版日期:2014-04-08 发布日期:2014-04-08
通讯作者: 朱天辉，教授，E-mail：zhutianhui@yahoo.cn。

Fungus-inhibitory Activity and Gene Cloning of β-glucanase from Bacillus velezensis YB15

XU Ting¹, ZHU Tianhui¹, LI Shujiang², QIAO Tianmin³

1. College of Forestry, Sichuan Agricultural University, Ya'an 625014, China;2. Key Laboratory of Forest Protection of Sichuan Province, Ya'an 625014, China;3. Key Laboratory of Ecological Forestry Engineering for Upper Reach of Changjiang River, Ya'an 625014, China

Received:2013-01-29 Revised:1900-01-01 Online:2014-04-08 Published:2014-04-08

摘要/Abstract

摘要： 本文在对峙法验证贝莱斯芽孢杆菌B. velezensis YB15具抑菌作用的基础上，用透明圈法、DNS法研究其产β-葡聚糖酶特性，利用对峙法验证该酶抑菌作用，通过PCR法获得目的基因，分析克隆序列并预测其蛋白质结构与功能。结果表明，该菌株对多种病原真菌有拮抗作用，杨树紫纹羽病菌拮抗带达11.0 mm，该菌提取的葡聚糖酶粗酶液对杨树紫纹羽病菌抑菌带为10.6 mm，说明葡聚糖酶在菌株YB15抑菌中有重要作用。不同接种方法影响菌株YB15葡聚糖酶水解透明圈形成，点种法水解圈与菌落直径之比在72 h可达14.1，效果最好。克隆所得菌株YB15葡聚糖酶基因命名为Bglu1，该基因序列长732 bp，编码243个氨基酸，此酶蛋白氨基酸序列与解淀粉芽孢杆菌TB2 β-1,3-1,4-葡聚糖酶同源性较高，属糖基水解酶16家族，N端疏水区存在信号肽并具跨膜区域，推测其为分泌蛋白。

Abstract: On the basis of fungus-inhibitory activity tested with dual culture method, authors studied characteristics of β-glucanase produced by B. velezensis YB15. Results showed that the strain played an antagonistic role against many pathogenic fungi. Width of inhibition zone against Helicobasidium purpureum was 11.0 and 10.6 mm by YB15 and its β-glucanase crude enzyme, respectively. Different inoculation methods could impose impacts on the formation of the hydrolytic transparent circle of the glucanase of YB15. The proportion of hydrolytic circle and colony diameter by dibbling could be up to 14.1 at 72 h. The cloned gene of YB15 β-glucanase named as Bglu1 was 732 bp in length and encoded 243 amino acids. The protein showed high homology with β-1,3-1,4-glucanase of B. amyloliquefaciens TB2 belonging to glycosyl hydrolase-16 family. The N-terminal hydrophobic domain had signal peptide and transmembrance domain.

中图分类号:

S476

徐婷1 , 朱天辉1 , 李姝江2 , 谯天敏3 . 贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis YB15 β-葡聚糖酶的抑菌作用与基因克隆[J]. , DOI: .

XU Ting¹, ZHU Tianhui¹, LI Shujiang², QIAO Tianmin³. Fungus-inhibitory Activity and Gene Cloning of β-glucanase from Bacillus velezensis YB15[J]. , DOI: .

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